ibidi：細胞培養、免疫熒光等細胞實驗好幫手

1.一體化小室——細胞培養&顯微成像兩用玻片/皿 

細胞免疫熒光實驗你是怎么做的？

還在用小玻片，先泡酸、再晾干、再 coating、再種細胞、染色、封片成像？

那您太 out 了吧！

使用 ibidi 產品，先養細胞、然后直接固定、染色、成像，在培養皿/玻片上全部搞定！能幫您把細胞養好、又幫您省時省力的獲得漂亮的成像結果（見圖 1）！

 

圖 1. 傳統爬片方法與 ibidi 產品免疫熒光實驗比較

2.ibidi 產品底部媲美蓋玻片厚度，為高分辨率顯微成像而設計的光學特性 

德國 ibidi 公司創新的μ-Slide 與μ-Dish 系列產品，與一般市面上常見的細胞培養皿不同，其底部是由獨特的塑料制成，具有與玻璃材質媲美的高光學穿透與低背景熒光等特性。相較于一般細胞培養產品（圖 2 左），ibidi 產品（圖 2 右）底部構造厚度符合 No.1.5 標準蓋玻片厚度（180 μm），用高倍鏡物鏡觀察，可以使焦距集中在待測樣本上，產生良好的成像結果。



圖 2. ibidi 細胞培養產品底部媲美蓋玻片厚度

3.ibidi 產品底部化學耐受性強，適用于多種常用的細胞固定劑（見圖 3）圖 3.ibidi 產品底部適用的溶劑列表 



4.多種多樣的細胞培養表面 

細胞進行生長、發育和信號傳遞很大程度上取決于細胞容器的表面處理方式。ibidi 產品底部相比于普通培養皿更加平滑（見圖 4）。目前，ibidi 產品μ-Slides 和μ-Dishes 有標準底、玻璃底以及多種底部預包被的產品，適用于培養不同的細胞類型，不同底之間的比較見圖 5。

ibidi 標準底具有親水超薄的特性，該底部的光學特性符合多種成像技術的要求，如相差、共聚焦和雙光子顯微成像。

ibiTreat，作為 ibidi 受歡迎的表面處理方式，通過了大量不同細胞系和原代細胞培養測試，且已發表的 2000 多篇使用了 ibidi 產品的期刊論文中，超過 90% 使用了 ibiTreat，表明大多數細胞在 ibiTreat 下生長良好，無需進行額外的表面處理。ibiTreat 是一種物理修飾的表面處理方式，讓耗材表面親水，利于絕大多數種類的細胞貼壁，可與其他標準細胞培養瓶和培養皿相媲美。

圖 4. AFM（原子力顯微技術）測量表面粗糙度。ibidi 產品（右下）比普通培養皿具有更平滑的底部構造，更加的成像效果。

ibidi 標準底也有疏水、無包被的表面可以選擇。可以根據具體的實驗需求，進行特定的包被，或者直接用來培養非貼壁細胞。

Ibidi 也有玻璃底的產品。玻璃底可以直接培養細胞，但可能需要進行表面處理來促進細胞更好的貼壁。ibidi 研發的玻璃底產品尤其適用于 TIRF、單光子及單分子應用。

圖 5. ibidi 標準底與 ibidi 玻璃底 

基于以上特殊的底部構造，ibidi μ-Dish，μ-Slide 以及μ-plate 等產品都既適用于常規細胞培養，又可以簡化免疫熒光實驗步驟、節約實驗時間，并且獲得理想的顯微成像效果。

ibidi μ-Dishes

ibidi μ-Dishes 產品可以進行常規的細胞培養、轉染、免疫熒光實驗以及高分辨率顯微成像。目前 ibidi μ-Dishes 主要包括 35 mm（高壁和低壁）以及 50 mm 兩種（見圖 6）。50 mm 更適合于培養大量細胞，如需要收集細胞做生化實驗等。35 mm 低壁的產品更適合于在顯微鏡下對細胞進行操作，如進行電生理膜片鉗記錄細胞，或者吸取單細胞進行單細胞基因組測序等實驗。

圖 6. ibidi μ-Dish 系列產品：35 mm（high wall 和 low wall），50 mm（low wall）。

ibidi μ-Dishes 另外一個精巧的設計是帶鎖的蓋子（見圖 7）。當蓋子處于 lock 位置，較大程度減小蒸發的影響，因而可以在非濕潤環境中進行長時程的細胞實驗，如需要在培養箱外，顯微鏡下進行長時程的活細胞觀察實驗。由于 Dish 特殊的氣體通透特性，在細胞培養期間氣體交換（C02，O2）是并不受 lock 位置影響的。

圖 7. 帶鎖的培養皿設計

μ-Slides well 系列產品：μ-Slides 2 well，4 well，8well如果您希望同時獲得多個樣品的顯微成像結果，如比較同種細胞加入不同藥物刺激的形態變化，或者實驗初期用來篩選好用的抗體及摸索理想抗體濃度等實驗，推薦使用μ-Slides well 系列產品（見圖 8）。不同大小的開放小室適用于不同量的細胞培養。其底部也是 ibidi 標準底處理，滿足細胞培養、免疫熒光實驗、高分辨率顯微成像的需求。

圖 8. μ-Slides well 系列產品：μ-Slides 2 well，4 well，8well在此基礎上，如果需要進行更佳的相差或者高的顯微鏡成像實驗，如進行實時的活細胞不同位點的掃描，μ-Slides well ph+系列產品更適合您。在傳統的μ-Slides well 的孔的中間，ph+產品加了一層特殊的平板（見圖 9），這層平板可以有效避免開放小室中影響相差成像效果的凹液面的形成。在這層平板與 well 的四周有縫隙，方便向其中加入細胞及換液等操作。

圖 9. μ-Slides well 與 μ-Slides well ph+ 產品以及成像對比圖。A，產品對比圖，ph+在中間有特殊的平板，四周有孔洞，方便鋪細胞及換液等操作。B，ph+有效防止凹液面形成（右側），整個視野都有良好的相差成像效果。

帶網格（Grid）的 Dish、well 產品

以上產品還有底部帶網格的（見圖 10），如 35 mm Dish Grid-500，μ-Slides 8 well Grid-500。可應用于細胞及細胞團的重定位，特定區域發生事件的數目如細胞轉染效率的統計，細胞運動距離的參考，對單個細胞進行顯微注射或者追蹤軸突的生長等。同樣這些產品具備 ibidi 標準底設計，適用于高分辨率的顯微成像。

圖 10. 帶網格產品的底部網格圖示

μ-Slide channel 系列產品

一體化小室產品還包括μ-Slide channel 系列產品（圖 11A），這類產品有通道式的細胞培養空間，同樣具有 ibidi 標準底，適合于高分辨率顯微成像。產品兩端有魯爾接頭，可應用于流體剪切力實驗，即在培養基流動狀態下就行細胞培養。在開放小室中鋪細胞時，通常依賴于人為晃動操作，對于新手尤其容易使細胞聚團，導致細胞分布不均（圖 11C）。而通道式的設計，巧妙回避這一問題，只需要向通道中加入細胞懸液，無需晃動（圖 11B），輕松使細胞在通道中均勻分布（圖 11D）。另外當需要進行準確的少量試劑換液時，或者試劑、抗體珍貴，μ-Slide channel 系列產品將是理想選擇。

圖 11. μ-Slide channel 系列產品。A，μ-Slide I 及μ-Slide IV 產品圖示。B，μ-Slide I 為例說明系列產品適用步驟，向通道中加入 100 ul 細胞懸液，向一側儲液池中加入無細胞的培養液，向另一側儲液池中加入無細胞的培養液，置于培養箱中培養。C，開放小室的細胞分布，依賴于晃動操作，經常會分布不均勻。D，channel 中細胞的分布，由于其獨特的集合設計，使細胞非常容易的均勻分布在通道中。

Removable & Sticky 系列產品

考慮到有些用戶希望保存標本，ibidi 公司還開發了 removable 的硅膠培養室（圖 12A），用于細胞培養和顯微成像。將硅膠材料移除后，可以封片進行保存。

另外，ibidi 公司還開發了 Sticky 的 well 及通道（圖 12B-D）。這類產品通用性強，可與多種多樣的底部材料粘貼。而且對于不易放入通道培養的細胞、組織等，可以選擇先放在底部材料上，再將培養通道粘貼到其上進行實驗。

圖 12. Removable & Sticky 系列產品。A，12 well Chamber, removable。B，sticky-Slide I Luer。C，sticky-Slide 8 well。D，sticky-Slide VI 0.4。
 

易必迪 ibidi 公司專注于細胞培養及功能實驗的耗材及儀器開發，產品設計巧妙，適用于各種各樣的實驗需求，簡化實驗步驟，節約實驗時間。如果您也在培養細胞，也在做細胞免疫熒光實驗，也在做細胞功能實驗，那么快來試試 ibidi 系列產品吧，讓您實驗變得輕松簡單，事半功倍！